Materiali
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Colonie di batteri E.coli K-12
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Plasmide pGLO contenente il gene da inserire nella cellula
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Piastre di Petri
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Provette
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Anse sterili
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LB terreno di coltura
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LB terreno di coltura contenente antibiotico ampicillina
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LB terreno di coltura contenente antibiotico ampicillina e lo zucchero arabinosio
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Micropipette
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Ghiaccio
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Bagno termostatico
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stufa
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Transilluminatore (lampada UV)
Procedimento
Con un’ansa sterile si preleva una colonia batterica e la si pone in una provetta contenente la soluzione di trasformazione, con la micropipetta si aggiungono 25 µl di DNA plasmidico. Si pongono le provette in ghiaccio per 15 minuti. Si ripete il procedimento ma senza introdurre DNA plasmidico. Questa soluzione serve da controllo e contiene batteri non trasformati.
Con un’ansa si spalmano delicatamente le soluzioni di batteri in piastre diverse contenenti terreno di coltura LB e rispettivamente ampicillina e ampicillina e arabinosio. Dopo averli lasciati riposare per un'intera notte a 37° nella stufa, possiamo analizzare i risultati
